--微生物組作業--

一、工作範圍及作業時間：

工作範圍：細菌培養檢驗（MR-531），結核菌黴菌培養（MR-532），微生物抹片檢驗（MR-530），緊急痰液檢驗（MR-545)。

收件時間：00:00-24:00

若有23:00以後採集之檢體請依下列方式保存：

二、注意事項：

1. 採集微生物培養檢體，應用無菌操作技術，避免外在污染。
2. 檢體量應足夠，如果可能儘量用抽取方式，用棉籤採檢量較少，一支僅能做一項檢驗，但結核菌培養及黴菌培養不適合以棉籤方式送檢。
3. 採檢時間應適當，尿液、痰液培養（特別是結核菌培養）皆以早晨起床後，第一次檢體為佳。採集培養檢體應儘量在用藥前採集。
4. 送檢容器應適當，瓶蓋應鎖緊，避免容器外之污染。送檢容器應作適當的標記，包括姓名、床號、送檢時間和檢體種類。
5. Tissue & Biopsy Culutre：可用無菌黑頭試管或大的無菌尿杯（6ｃｍ直徑）裝檢體，應儘速將檢體送到檢驗室，檢體不可用福馬林等固定液處理，因為微生物會被其殺死無法培養。
6. Bone Marrow Culture：同血液培養送檢
7. Sputum Culture：收集前應請病人先用牙刷、牙膏清潔口腔，再由呼吸道深咳出痰，裝於無菌痰盒（4ｃｍ直徑）送檢。本組會先用革蘭氏染色篩檢檢體是否合格，若被通知唾液污染請儘速補檢體。若無法自咳可用抽痰方式，但必須在檢驗單上註明。
8. Genital Tract：培養應避免Vaginal wall的污染，並應註明採檢部位以利區別，否則檢驗室只能視為Vaginal discharge處理。
9. Stool Culture：檢體最好選有膿或有組織碎片部份，若疑是一般細菌（如Salminella，Shigella，Aeromonas hydrophila，Plesiomonas shigalloides，Staph. aureus等）感染，用竹棒取檢體置含有緩衝甘油液的糞便培養盒（內有指示劑，一般為紅色，若變成黃色表示已受污染，不可用）送檢。若疑似Campylobacter感染，應用專為Campylobacter設計的培養棉籤（Transtube for Campy）採檢，若有其他懷疑則應先與檢驗室連絡送檢方式後再送檢。
10. Urine Culture：尿液採集前應指導病人先以消毒水或中性肥皂清洗尿道口及其附近，用無菌紗布擦乾後，先排棄前段尿液，以無菌尿杯（6ｃｍ直徑，單獨包裝）收集中段小便送檢。若病人無法自主小便，可採導尿方式送檢，絕不可用尿袋內尿液送檢，另懷疑厭氧菌感染必須用膀胱穿刺方式送檢。送檢方式應在檢驗單上註明清楚以利結果判讀。若為幼兒，可用尿袋，但以收集一次小便為限，不可用儲尿。
11. Throat Swab Culture：在良好照明下以無菌棉棒拭病灶滲出物，儘量避免接觸舌頭及唾液。如果疑似白喉，應挑開偽膜再以棉棒重力擦拭偽膜下的滲出物，且採2支棉棒，一支用於培養，一支用來染色；棉棒必須置Transtube運送培養基送檢，送檢前應先與檢驗室連絡再送檢，以利準備特殊的培養基。
12. Tip Culture：若為CVP Tip必須以無菌方式，取血管內5ｃｍ長Tip，置無菌黑蓋試管送檢，其他Tip應註明來源，Foley Catheter Tip不適合作培養。
13. 血液培養檢體採集步驟

1. 先以肥皂洗去皮膚污垢後，將穿刺靜脈上的皮膚，血液培養瓶及抽血者的手指以70%酒精® 2%碘酊®70%酒精三道手續加以消毒。
2. 繫上止血帶抽取6∼10ml血液（指一般培養。若為疑似黴菌感染患者則抽取5ml，嬰兒或小孩則只抽取1-3ml）。
3. 一般血液培養將6∼10ml血平分到二瓶血液培養瓶（先注入黃色培養瓶，再注入藍色培養瓶）。黴菌培養則將5ml血注入黴菌專用之血液培養瓶。
4. 每一病人抽血次數以總共3次為原則，若病人已用過藥，則應增加到４∼６次。
5. 抽血時機：嚴重的敗血症，在治療前立即在不同部位抽血２次。若疑為心內膜炎，則在頭24小時，抽血３次，每次間隔１小時為原則，其中應有２次在正要開始發熱時抽血。疑為菌血症而已治療病人，若無法停止治療，應在48小時內送3∼5次。
6. 分離出來的細菌若為Bacillus，Diphtheroids，Propionebacterium或Staph. epidermidis，可能是採檢或培養過程中受到污染所致；但如同一病人，連續2次以上分離相同細菌應懷疑為致病菌。

14. Pus(Wound) Culture：採取前先用70%酒精或2%碘酊消毒周圍皮膚；若傷口很髒，可用無菌不含任何抗生素的Normal Saline沖洗傷口再取檢體。若是皮膚或黏膜下之膿瘍，僅可能以針筒抽取檢體，若無法抽取則可酌以無菌刀片切開，並以無菌棉棒壓擠，取其膿血送檢。深部感染應同時送厭氧和需氧菌培養，以抽取方式採檢，打入無菌試管或直接針頭內送檢，若無法抽取才以棉棒送檢；以棉棒送檢，由於檢體量少應送２支，至少要有１支以厭氧棉籤（Anaerobic Culturette）送檢。
15. Body Fluid Culture：先以７０％酒精或２％碘酊消毒皮膚後，才用針筒抽取。將檢體注入無菌黑蓋試管，即可送檢(應盡量避免用棉棒送檢)。此外必須在檢驗單上註明檢體名稱。
16. CSF Culture：以最嚴格無菌技術抽取，置無菌黑蓋試管送檢，檢體必須馬上送檢，絕不可置冰箱保存。
17. 下列檢體不適合作厭氧培養：

Sputum，Midstream or Catheterized Urine，Vaginal specimen，Prostatic Fluid，Feces，Gastric Washing，Eye，Ear，Paronychia，Throat Swab，Nose Material，Skin material，Mouth material，Ilestomy material，Colostomy material，Fistula Materia.

18. Gonococcus Culture：此類檢體必須儘速送檢，絕不可置冰箱保存。
19. 一般培養分離出的細菌之藥物感受性試驗以Disk Diffusion方式操作，由CSF、體液和血液中分離的細菌以Microdilution方式操作，含有MIC結果。
20. 藥物感受性結果以S（Susceptible），R（Resistance）和I（Intermediate）方式報告。I表示介於S與R中間，是否可提高使用濃度以達治療效果，請依藥物毒性及臨床狀況選擇。
21. B. pertussis、Legionella、Ureaplasma若要送檢請事先與本組連絡。
22. B. pertussis、Legionella、Ureaplasma、TB目前已設自費之DNA篩檢方法。如有問題請電8367、8368查詢。
23. 其他問題查詢，請電8367、8368郭安靜組長。

三、目前微生物組主動通知項目：

1. 門診病人之body fluid，CSF，Blood culture之陽性培養，當天以電話主動通知主治醫師，以及所有TB smear 陽性和TB新病人彙集通知感染管制小組統籌監控
2. 住院病人之body fluid，CSF，Blood culture之培養陽性及TB smear陽性、B新病人，當天以電話主動通知病房
3. ER病人之body fluid，CSF，Blood culture之培養陽性及TB smear陽性、TB新病人，當天以電話主動通知 ER或以書面彙總單寄ER護理長